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研究论文
西草净分子印迹电化学传感器的制备及应用
陈昱安, 顾丽莉, 师君丽, 朱潇, 李子怡, 佟振浩, 杜康, 孔光辉
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0070
摘要:
为了解决大型检测仪器在检测过程中的局限性,利用分子印迹技术,以西草净为模板分子、甲基丙烯酸为功能单体,采用原位引发聚合法,在玻碳电极表面进行热聚合成膜,制备出西草净分子印迹电化学传感器,并将其用于样品中西草净含量的检测。采用循环伏安法 (CV) 对印迹电极的电化学性能进行了测试,并使用超高效液相色谱-串联质谱法 (UPLC-MS/MS) 对测试结果进行验证。结果表明:在滴涂量为10 μL、60 ℃下热聚合制备出的西草净电化学传感器具有良好的选择性、重复性和稳定性,其线性范围为0.5~1 μmol/L(1) 和2~30 μmol/L(2),对应的线性关系分别为I1(μA) = −3.33c(μmol/L)+39.03,I2(μA) = −0.75c(μmol/L)+35.52,相关系数分别为r1 = 0.985,r2 = 0.997,检出限 (LOD) 分别为LOD1 = 0.13 μmol/L和LOD2 = 0.89 μmol/L。将所建立的西草净分子印迹电化学检测方法用于烟叶添加样品提取液中西草净的检测,该印迹电极能够在8 min内完成对烟叶添加样品提取液中西草净的吸附,回收率为76%~88%,相对标准偏差为2.7%~7.6%,该方法能够初步满足烟草中西草净快速检测的需求。
九种除草剂对玉米田杂草的防除效果及其安全性评价
甘林, 卢学松, 兰成忠, 代玉立, 杨秀娟
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0029
摘要:
为明确9种常用除草剂对玉米田杂草的防除效果及其安全性。在福建省甜玉米制种田,采用茎叶喷雾法开展了9种除草剂在推荐剂量下的田间药效试验,并测定了除草剂对甜玉米及其后茬花椰菜和萝卜的安全性。结果表明,施药后25 d,9种除草剂的杂草株防效和鲜重防效均在92%以上;施药后50 d,27%烟•硝•莠去津可分散油悬浮剂 (810 g/hm2) 和25%硝磺•莠去津可分散油悬浮剂 (750 g/hm2) 处理的杂草防除效果最好,以20%氯氟吡氧乙酸乳油 (180 g/hm2) 处理的杂草防除效果最差,杂草覆盖表现为重度。供试的9种除草剂对甜玉米生长安全,无明显的药害症状,且部分药剂有增产效果,其中以25%硝磺•莠去津可分散油悬浮剂、20%烟嘧•辛酰溴苯腈可分散油悬浮剂 (300 g/hm2)、80%莠去津可湿性粉剂 (1 440 g/hm2) 和27%烟•硝•莠去津可分散油悬浮剂处理的玉米产量较高,与对照相比,增产率分别为21.03%、19.26%、18.74%和16.84%。10%硝磺草酮悬浮剂 (150 g/hm2)、27%烟•硝•莠去津可分散油悬浮剂、33.5%硝磺•异丙草胺•莠去津悬浮剂 (1 005 g/hm2) 和30%苯唑草酮悬浮剂 (27 g/hm2) 处理对后茬花椰菜和萝卜均有较好的增产效果,增产率分别为18.05%和13.68%、3.37%和12.67%、15.45%和11.06%、8.21%和11.67%。但40 g/L烟嘧磺隆可分散油悬浮剂 (60 g/hm2) 对后茬花椰菜和萝卜的生长有抑制作用,与清水对照相比,分别减产9.74%和3.57%。研究结果可为甜玉米田杂草防除有效药剂的合理选择和应用提供科学依据。
响应面优化烟草提取物微囊制备工艺
陈运泽, 张博文, 吴德东, 曾健勇, 杨璟, 张国财
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0038
摘要:
烟草提取物具有良好的杀虫活性。为提高其稳定性,以烟草提取物为芯材,明胶、阿拉伯胶为壁材,采用复凝聚法制备了烟草提取物微囊。以包埋率为评价指标,采用响应面法对微囊制备工艺进行优化。对微囊进行了表面形态观察、粒径测定、红外光谱分析、热稳定性分析及室内毒力测定。试验结果表明:当乳化剂质量分数4%、明胶质量分数2.05%、阿拉伯胶质量分数3%、壁芯质量比1.34 : 1.00以及复凝聚反应时间为36 min时,制备的微囊包埋率最高,理论包埋率为58.93%。经验证,在此条件下实际包埋率为58.42% ± 0.12%,接近理论值。所得微囊表面光滑,成囊性好,粒径分布在4.72~17.05 μm之间,中位径8.63 μm;在877.55和2 922.13 cm−1处保留了烟草提取物的红外特征峰;微囊化能够提高烟草提取物的热稳定性;室内毒力测定表明烟草提取物微囊的LC50值为20.19 mg/mL,与烟草提取物的毒力水平相当,说明微囊化没有降低烟草提取物的毒力。本研究可以为烟草提取物微囊制备提供参考。
浙江省稻田藤仓镰孢霉对咪鲜胺的敏感性及抗药性菌株的适合度与交互抗性
毛程鑫, 陆强, 周小军, 张书亚, 张宇, 张传清
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0071
摘要:
为了明确浙江省水稻恶苗病主要致病菌藤仓镰孢霉Fusarium fujikuroi对咪鲜胺的抗性现状,以1 μg/mL为区分剂量,对2017和2018两年采自浙江省绍兴、嘉兴和金华3个地区稻田的共400株藤仓镰孢霉F. fujikuroi对咪鲜胺的抗性进行了检测,并测定了抗药性菌株的适合度及其对其他常用甾醇合成抑制剂类(DMIs)杀菌剂的交互抗性。结果表明:两年的抗药性菌株频率分别为53.2%和46.7%;多数田间敏感菌株在产孢能力和孢子萌发能力上强于田间抗药性菌株,在菌丝生长速率和致病性方面则两者差异不大;就水稻恶苗病菌而言,咪鲜胺与丙硫菌唑之间存在交互抗性,但咪鲜胺与戊唑醇、苯醚甲环唑、丙环唑、叶菌唑、己唑醇和三唑酮之间均不存在交互抗性。研究表明,浙江省稻田藤仓镰孢霉对咪鲜胺已经产生了严重的抗药性,需要轮换使用不同作用机制的杀菌剂进行防治。
腈菌唑在番茄果实中的立体选择性降解
齐艳丽, 李春勇, 李晋栋, 高婧, 任鹏程, 连少博, 王霞, 乔雄梧, 秦曙
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0074
摘要:
为明确田间条件下手性杀菌剂腈菌唑对映体在番茄果实中的降解规律,采用Lux Cellulose-1手性色谱柱及超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱 (UPLC-MS/MS) 分析方法,研究了腈菌唑对映体的分离及其在番茄果实中的选择性降解。样品经乙腈提取,采用QuEChERS 方法净化。分析方法验证结果表明:在0.000 5~0.05 mg/L线性范围内,腈菌唑对映体的峰面积与其浓度间呈良好的线性关系,R2均大于0.99;腈菌唑对映体在番茄中的平均回收率在92%~96%之间,相对标准偏差 (RSD) 在1.0%~3.0%之间。降解试验结果显示:腈菌唑对映体在番茄果实中的降解规律符合一级反应动力学方程,其降解半衰期在2.77~4.08 d之间;腈菌唑对映体在番茄果实中的降解具有明显选择性,随时间延长,其对映体分数 (FE) 值由最初的0.47下降为0.24,其中S-(+)-腈菌唑优先降解,从而导致R-(–)-腈菌唑的相对富集。本研究从对映体的角度评价了腈菌唑在番茄中的降解,可为手性农药对映体的环境行为研究提供基础数据。
拟轮枝镰孢对多菌灵的敏感性及抗性菌株生物学性状和交互抗性
杨石有, 刘倩宇, 万亚美, 郭聪聪, 庞民好, 刘颖超, 董金皋
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0079
摘要:
为评价玉米穗腐病主要致病菌拟轮枝镰孢Fusarium verticillioides对多菌灵的敏感性,采用菌丝生长速率法测定了采自山东、河北、河南、四川、甘肃、辽宁及宁夏7省(自治区)的168株玉米穗腐病拟轮枝镰孢对多菌灵的敏感性,并对经过药剂驯化获得的拟轮枝镰孢抗多菌灵菌株主要生物学性状和交互抗性进行了研究。结果表明:多菌灵抑制拟轮枝镰孢菌丝生长的EC50值在0.013 2~0.774 0 mg/L之间,平均EC50值为(0.220 8 ± 0.143 7)mg/L。敏感性频率分布图显示,供试病原菌群体中已出现对多菌灵敏感性下降的亚群体,但其中仍有35.71%的菌株对多菌灵的敏感性频率呈正态分布,因此可将此部分菌株的平均EC50值 (0.081 4 ± 0.028 9) mg/L作为拟轮枝镰孢对多菌灵的相对敏感基线。药剂驯化共获得6株抗性菌株,抗性倍数在5.05~12.22之间。抗性菌株的菌丝生长速率及菌丝干重均低于亲本菌株,表明其抗性菌株的生物适合度有所降低,同时发现其抗药性均不能稳定遗传。室内交互抗性测定结果表明,拟轮枝镰孢对多菌灵的抗性与咪鲜胺、戊唑醇、三唑酮及吡唑醚菌酯之间不存在交互抗性关系。
25%双环磺草酮悬浮剂防除杂草稻的使用策略
田志慧, 盛光勇, 袁国徽, 沈国辉
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0111
摘要:
杂草稻Oryza sativa f. spontanea是一种危害水稻生产、具有杂草特征的水稻,筛选可防除杂草稻的除草剂可有效解决防除杂草稻的难题。为明确25%双环磺草酮悬浮剂防除杂草稻的使用策略,采用盆栽试验测定了25%双环磺草酮悬浮剂 (SC) 不同用药剂量、用药时间和用药方式 (喷雾法和毒土法) 对杂草稻的防除效果及对水稻的安全性。结果表明:25%双环磺草酮SC按有效成分150~375 g/hm2的剂量分别于杂草稻萌芽期、立针期、1~2叶期和2~3叶期施用,当采用喷雾法施药时,其对杂草稻的株数防效分别达98.0%~100%、94.0%~100%、94.0%~100%和83.0%~100%,而采用毒土法施药时,其防效分别为51.0%~100%、56.0%~93.0%、27.0%~89.0%和28.0%~71.0%;在有效成分为187.5 g/hm2和375 g/hm2剂量下,喷雾法施药对水稻各项生长指标无不良影响,而毒土法施药则对水稻株高、根长、根系和植株鲜重等均有抑制作用。表明与毒土法相比,喷雾法施药具有防除效果好、使用期宽和对水稻安全性高等优点。但该药的速效性较差,施药后20~30 d方能达到最佳防效。本着高效、经济、安全的原则,推荐25%双环磺草酮SC防除杂草稻的使用策略为:于杂草稻萌芽期至1~2叶期采用喷雾法施药,推荐使用剂量为有效成分150~187.5 g/hm2,如推迟至杂草稻2~3叶期防除,则使用剂量应提高至187.5~225 g/hm2。施药时应有水层1~2 cm,施药后保持水层5 d以上。
性诱剂与黑光灯对二化螟的诱捕效果及其影响因子
黄贤夫, 陈海波, 李程巧, 肖鹏飞, 朱国念, 叶建人
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0104
摘要:
在二化螟预测预报中,性诱剂和黑光灯两种诱捕方法被广泛采用,为比较这两种方法对稻田二化螟诱捕效果的差异,于2010—2014年在浙江温岭地区进行了相关研究,比较了两种诱捕效果的差异,并对诱芯和诱捕器种类、田间越冬幼虫量以及气象因子对二化螟诱捕效果的影响进行了研究。结果显示:对于越冬代二化螟,采用性诱剂和黑灯光诱捕的二化螟成虫数量的消长动态基本一致,但采用性诱剂诱捕的成虫峰期出现早、峰次多,而且诱捕量显著高于灯光诱捕;不同性诱剂诱芯与诱捕器之间的诱捕效果无显著差异;性诱剂和黑光灯两种方法诱捕的虫量与田间越冬的幼虫基数存在显著正相关关系;两种诱捕方法的诱捕虫量与气温密切相关,对于越冬代,诱捕的虫量与温度呈负相关,而其余各代的诱捕虫量则与温度成正相关。
基于登记用量分析三唑类杀菌剂在中国的登记现状
毛连纲, 徐冬梅, 袁善奎, 李富根, 张兰, 张燕宁, 朱丽珍, 蒋红云
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0103
摘要:
对中国农药信息网 (http://www.icama.org.cn/) 上登记的21种三唑类杀菌剂的信息进行分析,选择出单剂登记推荐有效成分用量差异大、离群高值点多的8种杀菌剂 (三唑酮、丙环唑、三唑醇、粉唑醇、烯唑醇、戊唑醇、腈菌唑和氟环唑),分别从登记的农药剂型、作物、防治靶标等方面对其以单剂登记的推荐有效成分用量进行统计分析,从中进一步筛选出推荐有效成分用量差异大、离群高值点数较多的3种有效成分 (戊唑醇、氟环唑和丙环唑)、4种登记作物 (草坪、香蕉、香蕉树和小麦) 和3种登记防治靶标 (褐斑病、叶斑病和白粉病) 进行组合,并对目前已登记的10种“有效成分-作物-靶标”组合进行数据分析。结果发现:1) 丙环唑防治草坪褐斑病的推荐有效成分用量最高 (936.00 g/hm2),且推荐有效成分用量差异数值最大 (180.00~936.00 g/hm2);2) 氟环唑防治香蕉叶斑病的离群高值点数最多,且推荐有效成分用量差异最大 (62.50~450.00 g/hm2),最大值与最小值相差7倍;3) 在防治小麦白粉病上,戊唑醇的推荐有效成分用量差异最大 (51.60~262.50 g/hm2),且离群高值点数最多,最大值与最小值相差高达5倍。为减少农药用量,建议在田间防治作物病害时,优先选择推荐有效成分用量较低的农药品种 (包括推荐有效成分用量更低的农药剂型和生物活性更高的农药有效成分)。另外,针对同一种农药制剂产品,建议不同厂家能统一确定合理的推荐有效成分用量。未来农药登记时将在农药最低有效剂量研究的基础上,针对不同作物的特定防治靶标提出更加科学、合理的推荐有效成分用量,为农药的合理减施提供科学依据。
噻呋酰胺对浙江省水稻立枯丝核菌的敏感性及其对稻田天敌群落的影响
张唯伟, 沈国强, 金磊, 何杰, 张传清, 朱国念, 刘亚慧
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0082
摘要:
分别从未使用噻呋酰胺及使用噻呋酰胺3年以上的浙江省稻田采集分离立枯丝核菌Rhizoctonia solani,通过监测、分析病原菌群体对噻呋酰胺的敏感性变化,研究水稻纹枯病对噻呋酰胺的抗药性风险;并通过田间试验评价了戊唑醇、井冈霉素和噻呋酰胺等纹枯病防治药剂对稻田天敌群落的影响。结果表明:浙江省未接触过噻呋酰胺的立枯丝核菌群体 (n = 164) 的EC50值分布在 0.008~0.135 mg/L 之间,且呈近似正态单峰曲线,平均EC50值为 (0.073 ± 0.005) mg/L,可作为立枯丝核菌对噻呋酰胺的敏感性基线,用于后续田间抗药性监测。接触过3年以上噻呋酰胺的立枯丝核菌群体 (n = 130) 的EC50值分布在 0.009~0.126 mg/L之间,平均EC50值为 (0.069 ± 0.08) mg/L,没有观察到明显的敏感性下降。对稻田天敌群落影响的田间试验表明,采用12%噻呋酰胺油悬浮剂 (OD) 药剂处理 7 d 后,绍兴稻田的 Shannon多样性指数和丰富度指数均显著高于对照,而其他时间和地点均与对照无显著性差异。本研究表明,采用噻呋酰胺防治水稻纹枯病的田间抗药性风险低,对稻田天敌安全性高。
百菌清及其代谢物4-羟基百菌清在三七上的残留行为及膳食风险评估
李文希, 浦恩堂, 代雪芳, 黄丽, 张雪燕
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0030
摘要:
为保证百菌清的安全使用,明确百菌清及其代谢物4-羟基百菌清在三七上的残留行为,2017年在云南三七主产区丘北、广南、弥勒和石林4地进行了百菌清在三七上的规范残留试验,建立了气相色谱 (GC-ECD) 测定三七中百菌清和超高效液相色谱-串联质谱 (UPLC-MS/MS) 测定4-羟基百菌清的残留分析方法。样品中百菌清用V (乙酸乙酯) : V (正己烷) = 2 : 8混合溶剂提取,硅胶固相萃取柱净化,GC-ECD检测;4-羟基百菌清用乙腈提取,N-丙基乙二胺 (PSA) 分散固相萃取净化,UPLC-MS/MS检测,外标法定量。结果表明:百菌清在三七块根和须根中的添加回收率为93%~98%,相对标准偏差 (RSD) 为3%~6%,定量限 (LOQ) 为0.05 mg/kg;4-羟基百菌清在三七块根和须根中的添加回收率为75%~94%,RSD为3%~9%,LOQ为0.02 mg/kg。丘北和广南的消解动态试验结果显示:百菌清在三七植株上的半衰期为8.4~8.5 d,4-羟基百菌清为16.5~17.3 d;百菌清和4-羟基百菌清在三七地下部分根系中的消解不符合一级动力学反应模型,在施药后45 d内,百菌清呈波动性缓慢下降,4-羟基百菌清呈波动性缓慢上升的趋势。4地的最终残留试验结果表明:采用40%百菌清悬浮剂,分别按其有效成分2 400和3 600 g/hm2的剂量喷雾施药3~4次,每次施药间隔为7 d,于末次施药后21 d采样测定,三七块根中百菌清的残留量为<0.05~3.14 mg/kg,4-羟基百菌清为0.19~1.54 mg/kg;三七须根中百菌清的残留量为0.085~0.76 mg/kg,4-羟基百菌清为0.46~4.48 mg/kg。膳食摄入风险评估结果显示,百菌清的国家估算每日摄入量 (NEDI) 为0.967 mg,风险商 (RQ) 为76.8%,4-羟基百菌清的NEDI为0.012 mg,RQ为2.4%,对一般人群健康不会产生不可接受的风险。
1-[2-苄氧基-2-(2,4-二氟苯基) 乙基]-1H-1,2,4-三唑衍生物的合成及杀菌活性
张敏, 张立孔, 孟振国, 朱祥, 高亚强, 李俊凯, 徐志红
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0044
摘要:
以抗真菌药物益康唑为先导化合物,设计合成了17个1-((2-取代苄基) 氧基)-2-(2,4-二氟苯基) 乙基)-1H-1,2,4-三唑类目标化合物,其中14个为首次报道,其结构均经1H NMR、13C NMR和HRMS确认。采用菌丝生长速率法测定了目标化合物对7种植物病原菌的抑制效果,并对毒力较高的化合物进行了其对水稻纹枯病和小麦条锈病的盆栽和田间药效试验,而且测定了其对水稻纹枯病菌麦角甾醇生物合成的抑制作用。结果表明:大多数目标化合物对测试病原菌菌丝生长有较强的抑制作用,尤其对水稻纹枯病菌和番茄早疫病菌的抑制作用最好,其中对水稻纹枯病菌的EC50值均低于3 μmol/L,明显高于对照药剂苯醚甲环唑和益康唑;化合物 4a4b4c4g4i4l 对番茄早疫病菌的EC50值均低于10 μmol/L。在浓度为250 μmol/L时,化合物 4b4i 对小麦条锈病的盆栽防效均超过70%,在有效剂量为240 g/hm2时,化合物 4b 对小麦条锈病的田间防效达到81.93%。而且,化合物 4b4i 在浓度为100 μmol/L时,可有效抑制水稻纹枯病菌麦角甾醇的生物合成,抑制效果在80%左右。
豆瓣菜中啶酰菌胺残留及膳食摄入风险评估
连少博, 王霞, 吕莹, 金静, 秦曙
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0027
摘要:
为评价啶酰菌胺在豆瓣菜生产上应用的安全性,采用QuEChERS方法进行样品前处理,液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 进行定量分析,检测了豆瓣菜中啶酰菌胺的最终残留量,对2种膳食食谱下的长期摄入风险进行了比较分析。结果表明,在添加水平范围内,在豆瓣菜空白样品中添加啶酰菌胺的平均回收率为89%~100%,相对标准偏差为5%~12%。GAP条件下,最终残留量为0.16~37.1 mg/kg。普通人群啶酰菌胺的国家估计每日摄入量 (NEDI) 为1.215 1 mg/(kg bw),风险商为48.2%,表明其对一般人群健康产生的风险是可接受的,同时,使用WHO提供的单独每种农产品膳食量进行计算,啶酰菌胺每日摄入量为0.083 0 mg/ (kg bw),风险商为3.3%。经过对比分析,推荐使用WHO提供的膳食食谱数据进行长期膳食风险评估。
高效液相色谱法测定二甲四氯在铁铝土中的吸附特征
吴东明, 李勤奋, 李怡, 邓晓, 武春媛
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0031
摘要:
二甲四氯 (MCPA) 是铁铝土区域广泛使用的一种除草剂,生物毒性大。吸附是控制MCPA在土壤中迁移/转化的关键过程。本研究建立了以C18为色谱柱、V(甲醇):V[水 (乙酸调pH值至2.5)] = 80 : 20为流动相、PDA为检测器 (检测波长280 nm) 的MCPA高效液相色谱检测方法,并结合批量平衡法评估MCPA在铁铝土中的吸附特征。结果表明:在0.5~40 mg/L内,MCPA的质量浓度与对应的峰面积间呈良好线性关系 (R2 = 0.999 9),检出限为0.2 mg/L,定量限为0.5 mg/L;回收率为98%~103%,相对标准偏差为3.5%~4.0%,适用于MCPA吸附试验的测定。铁铝土对MCPA的等温吸附过程符合Freundlich模型,吸附自由能△G<0,|△G|为9.34~14.73 kJ/mol,是一个自发的、非均质的、多层的物理吸附过程。吸附常数Kf值在0.85~4.24 L/kg之间,属于难吸附污染物,对地下水具有环境风险。不同铁铝土对MCPA的吸附作用受土壤pH值、有机质、矿物影响,表现为水稻土>暗红湿润铁铝土>简育湿润铁铝土。氢键结合、偶极间作用是吸附发生的关键作用力。
Civitas Pre-M1xed安全性评价及其对烟草赤星病的防治效果
樊杰, HSIANGTom, 李芝义, 刘畅, 周浩, 向立刚, 汪汉成, 余知和
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0043
摘要:
Civitas Pre-M1xed (以下简称Civitas) 是加拿大石油公司生产的一种食品级合成异链烷烃乳化剂化合物。本研究采用种子萌发和盆栽试验评估了Civitas的安全性,同时利用菌丝生长速率法测定了烟草赤星病菌Alternaria alternata对Citivas的敏感性,并采取盆栽方式评估了Civitas对烟草赤星病的防治效果。结果表明,相较于对照 (种子萌发率82.7%),1%和0.1%的Civitas对烟草种子萌发无抑制效应,而5%和10% 的Civitas对种子的萌发有抑制作用,萌发率分别为58.3%和32.1%。20%和10% Civitas对团棵期的烟株株高和茎围有一定抑制作用,而5%和1% 的Civitas则无明显影响;尽管不同供试浓度的Civitas对现蕾期的烟株株高生长无抑制效果,但20%和10% 的Civitas对该期烟株的茎围生长有一定抑制作用。此外,不同浓度的Civitas对烟草赤星病菌均表现出一定程度的抑制活性,且随Civitas浓度的增大而增强,20% 的Civitas的抑制率为54.1%。Civitas对烟草赤星病同时具有保护和治疗作用,5% 的Civitas直接喷洒烟叶10 d后,保护作用和治疗作用的防效分别为59.3%和19.6%。相关的研究结果可为Civitas的进一步安全性评价及潜在应用研究提供参考和依据。
黄柄曲霉ASD次生代谢产物的鉴定及抑菌活性
王辉, 毕于慧, 于志国, 刘长远, 王琦
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0021
摘要:
为明确土壤来源的黄柄曲霉ASD次生代谢产物中的抑菌物质及其生物活性,利用硅胶柱层析、凝胶柱层析和半制备高效液相色谱对ASD发酵液的二氯甲烷粗提物进行纯化,运用核磁共振及高分辨质谱技术,结合文献报道数据对纯化合物结构进行鉴定,利用X-射线单晶衍射验证鉴定结果;采用含药稀释平板法及菌丝生长速率法测定了2种化合物对辣椒疫霉菌、大斑凸脐蠕孢菌和禾生刺盘孢菌等9种病原真菌的抑菌活性。结果从ASD发酵液中分离获得已知活性抑菌物质为sulochrin与4,5-二甲基间苯二酚。其中,sulochrin对辣椒疫霉菌、大斑凸脐蠕孢菌和禾生刺盘孢菌有较好的抑制作用,4,5-二甲基间苯二酚只对辣椒疫霉菌具有较好的抑制作用,两者对灰葡萄孢菌、玉蜀黍尾孢菌和新月弯孢菌等6株致菌抑菌效果不明显或无抑制作用。
不同寄主来源的Monilinia fructicola对多菌灵的敏感性及其遗传结构特征
陈凤平, 张玥, 周挺, 李雄, 刘西莉
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0023
摘要:
美澳型核果链核盘菌Monilinia fructicola (G. Winter) Honey是引起多种果树褐腐病的重要病原菌,多菌灵是防治该病害的重要杀菌剂。为明确不同寄主来源的菌株对多菌灵的敏感性及遗传结构差异,研究测定了来源于樱桃、李子和毛桃的17株菌株对多菌灵的敏感性,同时基于Tub2核苷酸序列分析了来源于樱桃和毛桃的32株M. fructicola群体的遗传多样性和群体分化特征。结果表明:来自樱桃、李子和毛桃的17株菌株对多菌灵的EC50<1 μg/mL和>1 μg/mL的菌株比例分别为58.8%和41.2%,其中EC50>50 μg/mL的菌株比例为17.6%。来自毛桃的菌株群体多样性比来自樱桃的高,其核苷酸多样性分别为3.25 × 10−3和0.94 × 10−3,单倍型多样性分别为0.883和0.242;两群体间存在显著的遗传分化,分化程度较高,其FST值达到0.148。单倍型网络分析结果显示:来自樱桃和毛桃的群体分别含有3种和9种单倍型,其中共有单倍型2种;不同单倍型在进化过程中主要发生了两个途径的进化,其中一个途径只出现了来自毛桃群体的1种单倍型,其他单倍型经过不同的突变步骤形成另一个途径。寄主特异性检验结果发现,来自樱桃的菌株具有一定的寄主特异性,而来自毛桃的菌株与寄主的关联性较差。综合研究表明,M. fructicola对多菌灵的抗性频率较高,且来自不同寄主的群体遗传结构差异性较大。
QuEChERS-GC-MS/MS法筛查花椒中115种农药残留
张艳峰, 徐鹏, 王会利
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0025
摘要:
建立了QuEChERS技术结合气相色谱-串联质谱 (GC-MS/MS) 同时检测花椒中115种农药残留的快速分析方法。样品采用优化的QuEChERS前处理方法处理,在多反应监测模式下用GC-MS/MS检测,基质匹配内标法定量分析。结果表明:在0.002~0.40 mg/L范围内,115种农药的质量浓度与内标物质量浓度的比值和对应的目标物峰面积与内标物峰面积的比值间呈良好的线性关系,相关系数r均大于0.99;定量限为0.01~0.02 mg/kg;在0.01、0.02、0.05、0.10和0.20 mg/kg 5个浓度添加水平下,115种农药的平均回收率为51%~150%,RSD为0.8%~34%,其中80种农药的平均回收率在70%~120%,满足残留分析要求。该方法操作简便快捷、具有良好的准确度、精密度和灵敏度,为花椒中多种农药残留的快速筛查提供了可靠的分析手段。
浙江稻区千金子对氰氟草酯和噁唑酰草胺的抗药性及其分子机制研究
张怡, 陈丽萍, 徐笔奇, 宋雯, 姚晓明, 高吉良, 吴长兴
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0019
摘要:
千金子是中国直播稻田的优势禾本科杂草之一,严重威胁水稻的产量和品质。为了进一步明确浙江地区水稻田千金子对芳氧苯氧丙酸类除草剂的抗性发生情况,本研究从浙江部分稻区共采集了11个千金子种群 (其中1个为敏感种群),通过整株植物测定法检测了各种群对氰氟草酯和噁唑酰草胺的敏感性。结果显示:共有8个种群对氰氟草酯产生抗性 (抗性指数为2.1~79.1),9个种群对噁唑酰草胺产生抗性 (抗性指数为2.0~31.0),其中对氰氟草酯的抗性问题更为显著。在此基础上,通过基因扩增和克隆,对敏感种群和抗性种群的乙酰辅酶A羧化酶 (Acetyl-CoA carboxylase,ACCase) 基因部分序列进行比对,结果在3个抗性种群中发现突变,其中1个种群为Ile-1781-Val突变,另外2个种群则为Trp-2027-Cys突变。该研究结果表明,目前浙江部分稻区千金子种群已对氰氟草酯和噁唑酰草胺产生了抗药性,其中靶标酶基因突变是导致部分种群产生抗药性的原因之一。
研究简报
一种快速分离牡丹黄斑病病原菌的选择性培养基
徐建强, 秦玉佳, 张馨, 刘哲然, 李鹏飞, 夏彦飞, 郑伟, 侯颖
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0077
摘要:
采用传统的组织分离法分离牡丹黄斑病病原菌斑点叶点霉Phyllosticta commonsii时存在费时、费力且成功率低等问题,为提高分离效率,本研究利用杀菌剂抑菌谱的不同,以加入50 μg/mL硫酸链霉素的马铃薯蔗糖琼脂培养基为基础培养基,通过向该基础培养基中加入一定量的多菌灵、乙膦铝及代森锰锌,制备了一种在非无菌条件下即可分离牡丹黄斑病菌的选择性培养基。正交试验表明:该选择性培养基中多菌灵、乙膦铝及代森锰锌的适宜质量浓度分别为0.5、100~200及3.125~12.5 μg/mL。所制备的选择性培养基可有效抑制3种常见污染真菌——变幻青霉Penicillium variabile、黑曲霉Aspergillus niger和细极链格孢Alternaria tenuissima的生长,但对牡丹黄斑病菌的生长影响较小,可用于牡丹黄斑病菌的分离。
氟噻唑吡乙酮对马铃薯晚疫病最低有效防控剂量的研究
张建平, 张福金, 王振, 哈斯, 张欣昕
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0042
摘要:
由真菌致病疫霉Phytophthora infestans (Mont.) de Bary引起的晚疫病是马铃薯Solanum tuberosum L.的毁灭性病害,施用杀菌剂是马铃薯晚疫病防治必不可少的手段。为使新型优异杀菌剂10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂发挥更好的作用,2018—2019年开展了该药剂防治马铃薯晚疫病的最低有效防控剂量 (防治效果等于大于80%对应的施药剂量) 田间试验。结果表明:10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂按有效成分9.75~14.6 g/hm2处理,于第二次施药后14 d防治效果达80%以上,此剂量即为最低有效防控剂量,比农药登记推荐低剂量少用药50.0%~25.0%,可为农药减施和精准施药提供依据。
辣椒碱类似物的合成及杀虫活性
汪金波, 姬振蒙, 姬志勤, 魏少鹏
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0039
摘要:
基于辣椒碱结构,以香兰素胺盐酸盐和取代苄胺为原料,经N-酰化反应合成了6个系列204个辣椒碱类似物,其中14个为新化合物。通过核磁共振氢谱 (1H NMR) 对化合物的结构进行了确证。采用叶碟法测定了目标化合物的杀虫活性。结果表明:大部分目标化合物在10 μg/片下对供试的3龄东方黏虫Mythimna separata有较强的毒杀活性,其中化合物 A30D20D30D35E30 和F30 48 h致死率达100%,化合物 D19D21D22D23D31E29E31 48 h的致死率在90%以上。初步构效关系表明,苄胺苯环上氟原子单取代衍生物的杀虫活性优于氟原子双取代衍生物,其中以2-氟苄胺衍生物 (D系列) 杀虫活性较好;此外,酰基为2-噻吩甲酰时的杀虫活性明显优于其他取代基,表明酰基对该类化合物的杀虫活性也有显著影响。
丁香假单胞菌发酵液中的冠菌素含量测定方法及其应用
于春欣, 刘少金, 谭伟明, 李召虎, 段留生
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0022
摘要:
为了辅助提高工程菌种改良的效率,建立了一种简单、快速、高效的分散液-液微萃取-高效液相色谱检测丁香假单胞菌发酵液中冠菌素的分析方法。优化了蛋白沉淀法、萃取剂的种类和体积、分散剂的种类和体积、萃取时间和离心强度等对萃取率的影响。确定最优萃取条件为:以1.0 mL丙酮作为分散剂,400 μL氯苯为萃取剂,萃取5 min,在5 000 r/min下离心5 min。高效液相色谱的检测条件为:流动相为V (甲醇):V (0.5%乙酸水溶液) = 70:30,等梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30 ℃,检测波长220 nm。在3.5~100 mg/L范围内,冠菌素的峰面积与其质量浓度间呈良好的线性关系,相关系数 (r) 为0.999 8。方法的检出限为2.1mg/L,定量限为6.5mg/L。在6.5、25和100 mg/L添加水平下,冠菌素在丁香假单胞菌发酵液中的回收率在95%~98%之间,相对标准偏差 (n = 5) 在0.4%~9.6%之间。该方法可用于丁香假单胞菌发酵液中冠菌素含量的测定。
专论与综述
中国小麦纹枯病化学防治研究进展
李美霖, 徐建强, 杨岚, 郑伟, 夏彦飞, 侯颖
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0112
摘要:
随着秸秆还田等耕作栽培措施的推广,中国小麦纹枯病发生日趋严重,对小麦的高产、稳产造成了很大威胁。由于缺乏免疫及高抗病性小麦品种,生产中对纹枯病一直采用播期拌种及春季喷雾相结合的化学防治方法。文章总结了当前中国小麦纹枯病的发生现状及主要病原;评述了三唑类药剂对纹枯病菌的毒力及对纹枯病的防治效果,介绍了生产中小麦纹枯病菌对三唑类药剂的抗药性现状及机理,分析了三唑类药剂对小麦的安全性;同时阐述了井冈霉素、甲基立枯磷及其他种类药剂在小麦纹枯病综合防治中的应用;指出小麦纹枯病化学防治的发展方向应是将生防菌剂同化学药剂相结合,实现生物防治与化学防治的协同应用。
白腐真菌降解农药研究进展
王新, 李兆兴, 倪子钧, 宋磊
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0024
摘要:
白腐真菌是一类腐生的丝状真菌,其分泌的非特异性胞外氧化酶可以降解许多结构不同、毒性较高且难以降解的有机农药。本研究总结了白腐真菌对有机氯、有机磷、氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类农药的降解效果,并对部分农药的降解途径研究进展进行了综述,分析了白腐真菌降解农药的影响因素,同时对其应用前景进行展望。
Research Report
Novel herbicide bipyrazone for the control of resistant shepherd's purse (Capsella bursa-pastoris (L.) Medik.) in wheat
Lei LIAN, Xingtao LU, Jinlong WU, Hongjun ZHANG
, doi: 10.16801/j.issn.1008-7303.2020.0034
摘要:
Bipyrazone is a novel 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (HPPD) inhibitor, which has been registered in 2018 in China. To detect the resistant levels to bipyrazone, 35 populations of Shepherd's purse (Capsella bursa-pastoris (L.) Medik.) that might have herbicide resistance were collected from winter wheat fields in China with over 20 years tribenuron-methyl application history, and 1 susceptible population was collected from roadside in China. The resistant levels of Shepherd's purse populations to bipyrazone, tribenuron-methyl, florasulam, mesosulfuron-methyl, carfentrazone-ethyl and MCPA-sodium was detected by the whole-plant dose-response assay in the greenhouse. The results showed that 28 populations were resistant to tribenuron-methyl. Among them, 4 populations including K16009, K17005, 15053 and 17003, showed high levels of resistance. In the subsequent experiments, populations K16009, K17005, 15053 and 17003 were selected to evaluate the resistance to other herbicides. Populations K16009, K17005 and 15053 also showed high levels of cross-resistance to florasulam and mesosulfuron-methyl with resistant indices ranging from 25 to 321. Their GR50 was significantly higher than the registered field recommended rates. However, all those four tested populations were still sensitive to bipyrazone, carfentrazone-ethyl and MCPA-sodium. Especially, their GR50 were lower than the registered field recommended rates. Carfentrazone-ethyl and MCPA-sodium could be used to control the resistant shepherd's purse in wheat, but strict timing of herbicide application was necessary. The results indicated that bipyrazone could control the acetohydroxyacid synthase (AHAS) inhibitor-resistant shepherd's purse populations effectively.